HPLC的毛病及处置 转自丁香园
(一) 保留时候变更
1.柱温变更 柱恒温。
2.等度与梯度间未能充实均衡 最少用10倍柱体积的活动相均衡柱。
3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。
4.柱污染 天天冲刷柱。
5.柱内前提变更 不变进样前提，调理活动相。
6.柱快到达寿命 接纳掩护柱。
(二) 保留时候耽误
1.流速增添 查抄泵，从头设定流速。
2.样品超载 降落样品量。
3.键合相散失 活动相pH值坚持在3～7.5，查抄柱的标的目的，
4.活动相构成变更 避免活动相蒸发或积淀。
5.温度增添 柱恒温。
(三) 保留时候耽误
1.流速降落 管路泄露，改换泵密封圈，解除泵内气泡。
2.硅胶柱上活性点变更 用活动相改性剂，如加三乙胺，或接纳碱至钝化柱。
3.键合相散失 同前(二)3。
4.活动相构成变更 同前(二)4。
5.温度降落 同前(二)5。
(四) 呈现肩峰或分叉
1.样品体积过大 用活动相配样，总的样品体积小于**峰的15%。
2.样品溶剂过强 接纳较弱的样品溶剂。
3.柱陷落或构成短路通道 改换吃瓜91
柱，接纳较弱侵蚀性前提。
4.柱内烧结不锈钢生效 改换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品。
5.进样器破坏 改换进样器转子。
(五) 鬼峰
1.进样阀剩余峰 每次用后用强溶剂洗濯阀，改良阀和样品的洗濯。
2.样品中未知物 处置样品。
3.柱未均衡 从头均衡柱，用活动相作样品溶剂（特别是离子对吃瓜91
）。
4.三氟乙酸（TFA）氧化（肽谱）天天新配，用抗氧化剂。
5.水污染（反相）经由过程变更均衡时候查抄水品质，用HPLC级的水。
(六) 基线噪声
1.气泡(锋利峰) 活动相脱气，加柱背面压。
2.污染(随机噪声) 洗濯柱，污染样品，用HPLC级试剂。
3.检测器灯持续噪声 改换氘灯。
4.电搅扰（偶尔噪声）接纳稳压电源，查抄搅扰的来历（如水浴等）。
5.检测器中有气泡 活动相脱气，加柱背面压。
(七) 峰拖尾
1.柱超载 降落样品量，增添柱直径接纳较高容量的牢固相。
2.峰搅扰 洁净样品，调剂活动相。
3.硅羟基感化 加三乙胺，用碱至钝化柱增添缓冲液或盐的浓度，降落活动相pH值，钝化样品。
4.同前(四)4。
5.同前(四)3。
6.死体积或柱外体积过大 毗连点降至*低，对一切毗连点作适合调剂，尽能够接纳细内径的毗连管。
7.柱效降落 用较低侵蚀前提，改换柱，接纳掩护柱。
(八) 峰展宽
1.进样体积过大 同(四)1。
2.在进样阀中形成峰扩大 进样前后排挤气泡以降落分散。
3.数据体系采样速度太慢 设定速度应是每峰大于10点。
4.检测器时候常数过大 设定时候常数为感乐趣**峰半宽的10%。
5.活动相粘度太高 增添柱温，接纳低粘度活动相。
6.检测池体积过大 用小体积池，卸下热互换器。
7.保留时候太长 等度洗脱时增添溶剂含量也可用梯度洗脱。
8.柱外体积过大 将毗连管径和毗连管长度降至*小。
9.样品过载 进小浓度小体积样品。